产品


【名称】:人多叶核细胞分离液

【规格】:200ml

【货号】:Poly-H-200

【品牌】:山进生物

【价格】:1050   756

【说明书】:点击下载

【储存和运输】:

产品详细介绍

人多叶核细胞分离液,是即用型,无菌的,用于从人外周血通过密度梯度离心分离得到多叶核细胞的产品。

主要化学成分:羟乙基淀粉480和泛影葡胺钠。

分离原理:本分离液的高渗透压可使红细胞失水而缩小,从而增大红细胞的有效浮力密度;分离液中的羟乙基淀粉480能使红细胞聚集并在溶液中快速沉降,随着离心过程红细胞的逐渐沉降,分离液也形成连续梯度,这样只要离心力和离心时间选择合适,即可将多叶核细胞停留于分离液中,而红细胞沉降在分离液底部,并且单个核细胞(PBMC)仍就停留于分离液和血液的界面,从而达到同时分离获得多叶核细胞和单个核细胞的效果。

操作步骤

  1. 采集到的抗凝全血,为获得最佳的实验结果,最好在取血2h 内进行实验,血液存放时间越长,细胞分离效果越差。血液放置超过6h后,分离效果更差甚至不能达到分离目的。全过程样本、试剂及实验环境均需在20±2℃的条件下进行。
  2. 对于15ml离心管,小心吸取5ml血液样本加于5ml分离液之液面上;对于50ml离心管,小心吸取18ml血液样本加于18ml分离液之液面上。
  3. 水平转子离心机,离心力500-650g ,离心20-30min。
  4. 离心后,离心管中将出现两层环状乳白色细胞层,上层细胞为单个核细胞层(PBMC),下层细胞为多叶核细胞层。
  5. 吸取到的多叶核细胞用等体积0.45%的氯化钠溶液,或者一半浓度的培养基,稀释,以恢复渗透压到正常。
  6. 水平转子离心机,离心力400g,离心10分钟,即可得到多叶核细胞。如何需要,可以用生理盐水或培养基,再次稀释,再次离心。

注意事项:

如果想去除得到多叶核细胞里面的红细胞,可以用常用的红细胞裂解液。

血液样本不需稀释,直接进行分离即可。

储存条件:

常温保存,有效期2 年。本品易感染细菌,需无菌条件操作。无菌条件下操作,启封后置常温保存。如4℃保存,本分离液易出现白色结晶,影响分离效果。