上一篇推文小编整理了Cedarlane的人、小鼠、大鼠淋巴细胞分离液的使用说明。
本篇推文小编将继续整理出Cedarlane其他分离液的使用说明，供各位老师参考。
Part1：Lympholyte®-Rabbit Cell Separation Media (Rabbit)：
Lympholyte®-Rabbit是一种密度梯度分离介质，专门设计用于从兔淋巴组织中分离淋巴细胞。
注意：室温条件下使用分离液；样本制备可使用无血清培养基，减少样本粘度，更利于分离。
操作步骤：
1. 用推荐的方法和培养基制备淋巴细胞悬液。
建议的方法：
a）将脾切成小块
b）制备成组织匀浆
c）通过细筛网过滤
其他组织：彻底匀浆，获得干净的悬浮液
2.将细胞浓度调整至每毫升最多5x 106个有核细胞；
Note：如果细胞悬液中含有大量的碎片或红细胞，调整细胞浓度为2.5 x 106个细胞/mL，可得到更干净的分离。
3.根据不同的方法进行分离：
方法A：
①在离心管中加入5 mL Lympholyte®-Rabbit；
②使用移液管，小心地将5mL细胞悬液铺在Lympholyte®-Rabbit上，在液面上尽可能少地混合（图A）；
③由于Lympholyte®-Rabbit的密度比细胞悬液更大，因此将形成一个明显的界面（图C）。
方法B：
①在离心管中加入5mL的细胞悬液。将一个大的(23厘米）移液管放置到试管的底部（图B）；
②慢慢地向移液管中加入Lympholyte®-Rabbit，重力使其在稀释的血液下分层；
③继续处理，直到5mL Lympholyte®-Rabbit在细胞悬液分层。由于Lympholyte®-Rabbit比细胞悬液密度更大，因此会形成明显的界面（图C）；
4.在室温下，以1500g离心30分钟；
5.离心后，界面上将有一个明显的淋巴细胞层（图D）。使用移液管，小心地将细胞吸出，并转移到一个新的离心管中；
6.用培养基稀释转移的细胞，以降低溶液的密度。800g离心10分钟，沉淀淋巴细胞，然后弃用上清液；
7. 在进一步处理之前，在培养基中清洗淋巴细胞2-3次（在这个阶段可以使用含有血清的培养基）。
产品链接: http://www.shanjin.com.cn/product/54.html
Part2:Lympholyte®-Poly Cell Separation Media：
Lympholyte®-poly是一种经过0.22µm过滤器过滤和内毒素测试溶液的密度梯度分离液。它可用于从人全血中分离多形核粒细胞。
注意：为了达到最佳的分离效果，抗凝剂可选择EDTA、肝素或者柠檬酸。浓度为1.5mM的EDTA作为抗凝剂是最推荐的。
应在采血后2h内，室温条件下进行细胞分离。
操作步骤：
1.在离心管中小心地加入5 mL Lympholyte®-poly；
2.使用移液管，小心地将5 mL的全血铺在Lympholyte®-poly上，在界面上尽可能少地混合（图A）；
3.由于Lympholyte®-poly的密度比细胞悬液更大，因此将形成一个明显的界面（图B）。
4.在室温下，450-500g离心30-35分钟（较长时间的离心或较大的离心力将导致多形核细胞进一步向底部红细胞群沉积）；
5.离心后，红细胞聚集，将出现两条白细胞带（图C）。上层带为单核细胞，下层带为多形核细胞（约5-10mm）；
6.用移液管吸取多形核细胞条带，用等体积的等渗溶液重悬细胞，以恢复细胞正常渗透压。；
7.用2倍体积的生理盐水或培养基进一步稀释，400g离心10min，清洗细胞；
8.去除上清液，将细胞重悬至合适的缓冲液中，进行下一步实验。
产品链接：http://www.shanjin.com.cn/product/55.html
Part3：Lympholyte®-Mammal Cell Separation Media：
Lympholyte®-Mammal是一种密度分离介质，专门设计用于从大多数哺乳动物物种的外周血中分离活的淋巴细胞和单核细胞。
此前小编已整理了这款分离液的使用说明，详细的实验步骤各位老师可参考文章：
产品链接：http://www.shanjin.com.cn/product/68.html
译自：厂家说明书
转自（有修改）：https://mp.weixin.qq.com/s/iXZydhgasD9BCPVt60Sjmg
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