Cedarlane 公司起步于加拿大南部，现已在生命科学行业发展成为一家跨国公司。Cedarlane 为全球客户提供服务，在加拿大伯灵顿和美国北卡罗来纳州伯灵顿设有两个完善的仓库，提供各种抗体，不同种属分离液，补体和淋巴细胞分离柱等产品。
本篇推文小编将整理出Cedarlane分离液的使用说明，供各位老师参考。
Part1：Lympholyte®-H Cell Separation Media (Human)：
Lympholyte®-H是一种密度梯度分离介质，专门设计用于从人外周血和脐带血中分离淋巴细胞和单核细胞。
注意：使用前充分摇晃混匀，静止2-3min，待气泡消失后试用。（室温条件下使用分离液，分离液密度会随温度的变化而发生改变）
样本制备可使用无血清培养基，减少样本粘度，更利于分离。
操作步骤：
1.在含有抗凝血剂的试管中收集人血；
2.用等量培养基1：1稀释血液；
3.根据不同的方法进行分离：
方法A：
①在离心管中加入3 mL Lympholyte®-H；
②使用移液管，小心地将6 mL稀释的血液铺在Lympholyte®-H上，在液面上尽可能少地混合（图A）；
③由于Lympholyte®-H的密度比细胞悬液更大，因此将形成一个明显的界面（图C）。
方法B：
①在离心管中加入6 mL稀释后的血液。将一个大的(23厘米）移液管放置到试管的底部（图B）；
②慢慢地向移液管中加入Lympholyte®-H，重力使其在稀释的血液下分层；
③继续处理，直到3mL Lympholyte®-H在稀释的血液下分层。由于Lympholyte®-H比细胞悬液密度更大，因此会形成明显的界面（图C）；
4.在室温下，以800g离心20分钟；
5.离心后，界面上将有一个明显的淋巴细胞层（图D）。使用移液管，小心地将细胞吸出，并转移到一个新的离心管中；
6.用培养基稀释转移的细胞，以降低溶液的密度。800g离心10分钟，沉淀淋巴细胞，然后弃用上清液；
Note：如果需要去除血小板，可在这一步进行操作：
方法A
A.加入0.5 mL缓冲液和50 uL凝血酶，然后轻轻重悬细胞；
B.用缓冲液补足10mL，并充分混合；
C.非常缓慢地(100g）离心细胞3分钟；血小板会聚集并沉淀在底部；
D. 取出上清液（包含细胞），放入另一个试管中，留下聚集的血小板。
方法B
A.800 g离心1分钟，沉淀细胞；
B.倒出上清液，用缓冲液重悬细胞，重复2次；
C.此时会观察到，当血小板被移除时，产生的上清液会变得更加清晰。
7.在进一步处理之前，在培养基中清洗淋巴细胞2-3次（在这个阶段可以使用含有血清的培养基）。
产品链接：http://www.shanjin.com.cn/product/26.html
Part2：Lympholyte®-M Cell Separation Media (Mouse)：
Lympholyte®-M是一种密度分离介质，专门设计用于从小鼠淋巴样细胞悬液中分离活的淋巴细胞。
注意：使用前充分摇晃混匀，静止2-3min，待气泡消失后试用。（室温条件下使用分离液，分离液密度会随温度的变化而发生改变）
样本制备可使用无血清培养基，减少样本粘度，更利于分离。
1.用推荐的方法和培养基制备淋巴细胞悬液。
建议的方法：
将脾切成小块
制备成组织匀浆
通过细筛网过滤
其他组织：彻底匀浆，获得干净的悬浮液
2.将细胞浓度调整至每毫升最多2 x 107个有核细胞；
Note：如果细胞悬液中含有大量的碎片或红细胞，调整细胞浓度为1.0 x 107个细胞/mL，可得到更干净的分离。
3.根据不同的方法进行分离：
方法A：
①在离心管中加入5 mL Lympholyte®-M；
②使用移液管，小心地将5 mL的细胞悬液铺在Lympholyte®-M上，在界面上尽可能少地混合（图A）；
③由于Lympholyte®-M的密度比细胞悬液更大，因此将形成一个明显的界面（图C）。
方法B：
①在离心管中加入5 mL细胞悬液。将一个大的(23厘米）移液管放置到试管的底部（图B）；
②慢慢地将Lympholyte®-M加入移液管中，重力将其置于细胞悬液下。继续处理，直到5 mL Lympholyte®-M在细胞悬液下分层；
③由于Lympholyte®-M比细胞悬液密度更大，因此将形成一个明显的界面（图C）。
4.在室温下，1000-1500g离心20分钟；
5.离心后，在界面上将有一个明显的淋巴细胞层（图D）。用移液管，小心地将细胞从界面上吸出，并转移到一个新的离心管中；
6.用培养基稀释分离的细胞，800g离心10分钟，沉淀淋巴细胞，弃上清；
7.将淋巴细胞在培养基中清洗2-3次，随后进行进一步处理。
产品链接：http://www.shanjin.com.cn/product/29.html
Part3：Lympholyte®-Rat Cell Separation Media (Rat)：
Lympholyte®-Rat是一种密度分离介质，专门设计用于从大鼠淋巴细胞悬液中分离活的淋巴细胞。
注意：样本制备可使用无血清培养基，减少样本粘度，更利于分离。
1.用推荐的方法和培养基准备一个淋巴细胞悬液。
建议的方法：
将脾脏切成小块
制备成组织匀浆
通过细筛网过滤
其他组织：彻底匀浆，获得干净的悬浮液。
2.将细胞浓度调整为每毫升最多2 x 107个有核细胞。
注意：如果细胞悬液中含有大量的碎片或红细胞，如果细胞浓度设置为1.0 x 107个细胞/mL，可得到更干净的分离。
3.根据不同的方法进行分离：
方法A：
①向离心管中加入5 mL Lympholyte®-Rat；
②使用移液管，小心地将5 mL细胞悬液铺在Lympholyte®-Rat上，在界面上尽可能少地混合（图A）；
③由于Lympholyte®-Rat的密度比细胞悬液更大，因此将形成一个明显的界面（图C）。
方法B：
①在离心管中加入5 mL细胞悬液。将一个大的(23厘米）移液管放置到试管的底部（图B）；
②慢慢地将Lympholyte®-Rat加入移液管中，重力将其置于细胞悬液下。继续直到5 mL Lympholyte®-Rat在细胞悬液下分层；
③由于Lympholyte®-Rat比细胞悬液密度更大，因此将形成一个明显的界面（图C）。
4.在室温下，1000-1500g离心20分钟；
5.离心后，在界面上将有一个明显的淋巴细胞层（图D）。使用移液管，小心地将细胞从界面上吸出，并转移到一个新的离心管中；
6.用培养基稀释重悬细胞。800g离心10分钟，沉淀淋巴细胞，然后弃用上清液；
7.在进一步处理之前，在培养基中清洗淋巴细胞2-3次（现在可以使用含有血清的培养基）2-3次。
产品链接：http://www.shanjin.com.cn/product/32.html
译自：厂家说明书
转自（有修改）：https://mp.weixin.qq.com/s/8MFVkaZ3BX0pPj0wLL8M4A
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